黃曲霉素m1的檢測方法是什么？高效液相色譜法的原理是什么？

黃曲霉毒素M1(AFM1)，是一種有機化合物，化學式為C17H12O7，主要用于新陳代謝和致癌性的研究。2017年10月27日，世界衛生組織國際癌癥研究機構公布的致癌物清單初步整理參考，黃曲霉毒素M1在2B類致癌物清單中。

黃曲霉素m1的檢測方法是什么?

(1)AFM1標準溶液的配制

用三氯甲烷配制10μg/mL的AFM1標準溶液，用紫外分光光度計在357nm波長AFM1標準溶液的準確濃度(AFM1的摩爾消光系數為19950)，避光4℃保存備用。

(2)樣品提取

液體樣品直接加入甲醇振蕩過濾得提取液，固體樣品粉碎過篩或研磨混勻后，用一定比例的甲醇水溶液振蕩過濾得提取液。提取液可以先用石油醚和氯化鈉溶液分配凈化，再用三氯甲烷轉相提取，氯化鈉溶液水洗 ，無水硫酸鈉脫水后，收集三氯甲烷層于65℃水浴通風揮干，最后用三氯甲烷將蒸發皿中殘留物轉移至濃縮管中，減壓吹氣法將此液濃縮至一定體積后備用。

(3)點樣層析、展開、測定

各取10μL樣品用濃縮液和標準液分別點于己在105℃活化2h的硅膠G薄層板上，置于加入一定量的展開劑的展析缸中展開，橫展和縱展相結合，揮干后在紫外燈下觀察并測量Rf值(一般AFM1的Rf值為0.34)，并與標準溶液的最低檢出量(0.0004μg)的熒光強度相比較，同時用硫酸溶液(1:3)顯色劑噴熒光點，進行確證試驗，最后按樣品稱 量值、濃縮體積、總稀釋倍數、標準溶液最低檢出量進行計算。

高效液相色譜法的原理是什么?

用C18柱抽提純化樣品中的AFM1，乙醚對C18柱洗滌，再用CH2Cl2-乙醇洗脫AFM1，然后加入三氟乙酸(TFA)對AFM1進行衍生化處理，利用液相色譜熒光檢測器檢測，并與標準AFM1-TFA的衍生物比較，進行定性、定量分析。